Hvorfor bruger du enzym tomt og underlag i stedet for en enkelt for at finde ud af aktiviteten?

Forståelse af komponenterne:

* enzym tomt: Dette indeholder alt * undtagen * underlaget. Dets formål er at redegøre for enhver baggrundsaktivitet eller absorbans, der ikke skyldes enzym-substratreaktionen. Dette kan omfatte:

* enzym Auto-aktivitet: Nogle enzymer har muligvis en lille aktivitet, selv i fravær af deres specifikke underlag.

* Ikke-enzymatiske reaktioner: Selve bufferopløsningen eller andre komponenter i reaktionsblandingen kan bidrage til absorbansændringer.

* Substrat: Dette er det molekyle, som enzymet virker på for at producere et produkt.

* kombineret løsning: Dette vil omfatte både enzymet og substratet.

Hvorfor separate løsninger er afgørende:

1. nøjagtig måling af den specifikke reaktion: Brug af separate emner og substrater lader os isolere og måle aktiviteten udelukkende på grund af enzymets interaktion med dets specifikke underlag. Vi kan trække baggrundsaktiviteten målt i det tomme fra den samlede aktivitet målt i den kombinerede opløsning.

2. Fjernelse af interferens: Blanding af enzymet og underlaget på forhånd kan føre til:

* For tidlig produktdannelse: Enzymet kunne begynde at virke på underlaget, før eksperimentet begynder, hvilket fører til unøjagtige resultater.

* Enzymnedbrydning: Enzymet kan blive ustabilt eller inaktivt, hvis det er forblandet med underlaget i en længere periode.

3. kontrol over reaktionsstart: Ved at tilsætte enzymet og substratet separat får vi kontrol over det nøjagtige øjeblik, reaktionen begynder. Dette er vigtigt for at studere kinetikken i reaktionen (hvor hurtigt den fortsætter).

Eksempel:

Forestil dig at måle aktiviteten af ​​et enzym, der nedbryder et farvet underlag. Hvis du kombinerer enzymet og substratet, kan farveændringen muligvis starte med det samme, hvilket gør det vanskeligt at bestemme den faktiske reaktionshastighed. Brug af et tomt til at redegøre for enhver indledende farve og måle farveændringen specifikt på grund af enzymets handling på underlaget giver mere nøjagtige resultater.

Kortfattet:

Brug af enzymemner og underlag er separat afgørende for nøjagtige og pålidelige enzymaktivitetsmålinger. Denne metode sikrer, at vi kun måler den specifikke aktivitet af enzymet på dets underlag, eliminerer interferens og muliggør kontrolleret reaktionsinitiering.