Videnskab
 Science >> Videnskab >  >> Biologi

Hvad er formålet med salt i DNA -ekstraktion?

Salt spiller en afgørende rolle i DNA -ekstraktion, der tjener flere formål:

1. Udfældning af DNA:

* Salt (typisk NaCl) neutraliserer de negative ladninger på fosfatryggen i DNA.

* DNA -molekyler har en stærk negativ ladning på grund af fosfatgrupperne.

* Neutralisering af disse ladninger reducerer frastødelsen mellem DNA -molekyler, hvilket giver dem mulighed for at samle og udfælde ud af opløsningen.

* Dette nedbørstrin hjælper med at adskille DNA fra andre cellulære komponenter.

2. Cellelysering:

* Salt kan bidrage til cellelysering (nedbrydning af cellemembraner) i nogle ekstraktionsprotokoller.

* Det kan forstyrre integriteten af ​​cellemembraner, hvilket gør det lettere at frigive DNA fra cellerne.

3. Stabilisering af DNA:

* Salt hjælper med at stabilisere DNA -molekylet ved at interagere med phosphatgrupperne, hvilket reducerer deres tendens til at nedbrydes.

4. Forbedret DNA -binding til silicakolonner (i nogle metoder):

* I nogle DNA -ekstraktionsmetoder ved anvendelse af silicakolonner hjælper salt med DNA'et mere effektivt til silicamembranen. Dette forbedrer effektiviteten af ​​ekstraktionsprocessen.

5. Forebyggelse af RNA -nedbrydning:

* I nogle tilfælde kan salt hjælpe med at forhindre nedbrydning af RNA ved at hæmme aktiviteten af ​​RNaser (RNA-nedbrydende enzymer).

Generelt hjælper salt i DNA -ekstraktion primært at:

* separat DNA fra andre cellulære komponenter.

* stabiliserer DNA -molekylet.

* Forbedre effektiviteten af ​​DNA -binding til silicakolonner (i visse metoder).

Det er vigtigt at bemærke, at den nøjagtige rolle af salt i DNA -ekstraktion kan variere afhængigt af den anvendte specifikke protokol.