Hvilke molekyler er til stede i celler, der kan forstyrre DNA -ekstraktion?

1. Enzymer:

* nucleases: Disse enzymer nedbryder DNA. Der er to hovedtyper:

* dnases: Specifikt forringet DNA.

* rnaser: Nedbryder RNA, men kan også klæbe DNA under visse betingelser.

* Proteaser: Disse enzymer nedbryder proteiner, som kan binde til DNA og gøre det vanskeligt at isolere.

2. Polymerer:

* polysaccharider: Disse kulhydrater kan danne klistrede geler, der fanger DNA. Eksempler inkluderer glycogen i dyreceller og stivelse i planteceller.

* Proteiner: Som nævnt kan proteiner binde til DNA og hindre dets ekstraktion.

* lipider: Fedt og olier kan forstyrre DNA -nedbør og gøre det vanskeligt at fjerne fra opløsningen.

3. Andre cellulære komponenter:

* cellulose og lignin: Dette er strukturelle komponenter af plantecellevægge og kan være vanskelige at fjerne, hvilket hindrer DNA -isolering.

* sekundære metabolitter: Disse forbindelser kan produceres af planter og dyr og forstyrrer DNA -ekstraktion. Eksempler inkluderer tanniner, alkaloider og pigmenter.

* salte: Høje koncentrationer af salte kan forstyrre DNA -nedbør og hindre dets oprensning.

4. Forurening:

* Mikrobielt DNA: DNA fra bakterier, svampe eller andre mikroorganismer kan forurene prøver.

* Miljø -DNA: DNA fra kilder som jord, vand eller luft kan også forurene prøver.

For at tackle disse udfordringer inkluderer DNA -ekstraktionsprotokoller ofte trin, der:

* Lyse -celler: For at bryde cellemembranen op og frigive DNA.

* Inaktiverede enzymer: Gennem varmebehandling, kemiske hæmmere eller mekanisk forstyrrelse.

* Fjern interfererende stoffer: Gennem filtrering, nedbør eller andre metoder.

* Rens DNA: Ved anvendelse af teknikker som ethanoludfældning eller søjlekromatografi.

Det er vigtigt at overveje den specifikke type celle og den tilsigtede anvendelse, når man vælger en passende DNA -ekstraktionsmetode.