Hvilke laboratorietest bruges til at teste for tilstedeværelsen af ​​protein?

1. Biuret-test :Biuret-testen er en kolorimetrisk test, der påviser tilstedeværelsen af ​​peptidbindinger i en proteinprøve. Når en proteinopløsning blandes med en alkalisk kobbersulfatopløsning, dannes en lilla farve, hvis protein er til stede. Farvens intensitet er proportional med proteinkoncentrationen.

2. Bradford Assay :Bradford-analysen er en anden kolorimetrisk test, der bruger et farvestof kaldet Coomassie Brilliant Blue G-250 til at påvise protein. Farvestoffet binder sig til proteinmolekylerne og skifter farve fra brunt til blåt. Absorbansen af ​​opløsningen måles ved 595 nm, og proteinkoncentrationen kan bestemmes ved hjælp af en standardkurve.

3. Lowry-analyse :Lowry-analysen er en kolorimetrisk test, der måler mængden af ​​tyrosin- og tryptofanrester i en proteinprøve. Disse aromatiske aminosyrer reagerer med Folin-Ciocalteu-reagenset og giver en blå farve. Absorbansen af ​​opløsningen måles ved 750 nm, og proteinkoncentrationen kan bestemmes ved hjælp af en standardkurve.

4. BCA-assay :BCA-analysen (bicinchoninsyre) er en kolorimetrisk test, der ligner Lowry-analysen, men den er mere følsom og specifik for protein. Det involverer reaktionen af ​​protein med BCA i et alkalisk miljø for at producere en lilla farve. Absorbansen af ​​opløsningen måles ved 562 nm, og proteinkoncentrationen kan bestemmes ved hjælp af en standardkurve.

5. Kjeldahl-metoden :Kjeldahl-metoden er en kemisk proces, der bestemmer det totale nitrogenindhold i en prøve, som derefter bruges til at estimere proteinindholdet. Det involverer at fordøje prøven i koncentreret svovlsyre, omdanne nitrogenet til ammoniumsulfat og derefter titrere den frigjorte ammoniak med en standardsyre.

Disse tests giver kvantitative eller semikvantitative målinger af proteinkoncentration i forskellige prøver. Valget af test afhænger af faktorer såsom den nødvendige følsomhed, prøvetypen og tilgængeligheden af ​​ressourcer.