Hvad er adapter i rekombinant DNA -teknologi?

Her er en sammenbrud:

Hvad er det?

* Adaptere er små, specifikt designet DNA -sekvenser med klæbrige ender , som er korte, enkeltstrengede overhæng, der kan binde til komplementære sekvenser.

* De er typisk 10-20 basepar lange.

Hvad er deres formål?

1.

* Nogle gange har de DNA -fragmenter, du vil tilslutte dig, forskellige begrænsningsenzymskårne steder, hvilket resulterer i uforenelige mål.

* Adaptere kan ligeres til enderne af disse fragmenter, hvilket giver kompatible klistrede ender, som derefter kan sammenføjes med DNA -ligase.

2. Oprettelse af specifikke begrænsningsenzymsteder:

* Du har muligvis brug for et specifikt begrænsningsenzymsted til kloning eller andre manipulationer.

* Adaptere kan designes til at inkludere disse websteder, så du kan oprette det ønskede restriktionssted på DNA -fragmentet.

3. Tilføjelse af nye sekvenser:

* Adaptere kan bære specifikke sekvenser som promotorer, startkodoner eller andre regulatoriske elementer.

* Disse kan føjes til DNA -fragmentet ved at ligere adapteren.

hvordan det fungerer:

1. Begrænsningsfordøjelse: DNA -fragmentet af interesse fordøjes med et restriktionsenzym for at skabe klæbrige ender.

2. adapter ligering: Adapteren ligeres til de fordøjede ender af DNA -fragmentet ved anvendelse af DNA -ligase.

3. sammen med andre fragmenter: Det adapter-modificerede fragment kan derefter sammenføjes med andre fragmenter, enten ved ligering eller ved andre metoder, for at skabe et større DNA-molekyle.

Eksempel:

* Forestil dig, at du vil indsætte et gen i et plasmid.

* Genet er blevet skåret med enzym A, hvilket skaber klæbrige ender.

* Plasmidet er blevet skåret med enzym B, hvilket skaber forskellige klæbrige ender.

* Du kan bruge en adapter med klæbrige ender, der er kompatible med både enzym A og enzym B til at tilslutte sig genet og plasmidet.

Kortfattet:

Adaptere er alsidige værktøjer i rekombinant DNA -teknologi, der letter sammenføjningen af ​​DNA -fragmenter, oprettelse af specifikke restriktionsenzymsteder og tilsætning af nye sekvenser til DNA -molekyler. De spiller en afgørende rolle i manipulering af DNA til forskellige anvendelser, herunder genkloning, genterapi og diagnostik.