Sådan fungerer det:
1. Blodprøveforberedelse: Blodprøven behandles typisk med en lysebuffer for at bryde cellerne op og frigive deres indhold, inklusive DNA.
2. centrifugering: Den lysede prøve centrifugeres derefter ved høje hastigheder, hvilket skaber en densitetsgradient.
3. Sucrose Gradient: En saccharoseopløsning er lagdelt på toppen af den lysede prøve. Denne opløsning har en gradient af stigende saccharosekoncentration, hvilket skaber en gradient af stigende densitet.
4. adskillelse: Under centrifugering vil forskellige cellulære komponenter migrere til positioner i gradienten, hvor deres densitet matcher den omgivende saccharosekoncentration. DNA, der er relativt tæt, vil slå sig ned ved et specifikt lag inden for gradienten.
5. samling: Laget, der indeholder DNA'et, opsamles derefter og oprenses yderligere for at fjerne eventuelle resterende forurenende stoffer.
Derfor er saccharose ikke direkte involveret i nedbrydningen af celler eller isoleringen af selve DNA. I stedet fungerer det som et densitetsgradientmedium For at lette adskillelsen af DNA fra andre cellulære komponenter.
Vigtig note: Mens saccharose anvendes i nogle DNA -isoleringsprotokoller, kan andre metoder anvende forskellige densitetsgradientmedier som cæsiumchlorid (CSCL).