Videnskab
 Science >> Videnskab >  >> Biologi

Hvorfor vokser cellerne omdannet med PUC18 og plasmid lux i nærvær af ampicillin?

Cellerne transformeret med PUC18 og Plasmid Lux ​​vokser i nærvær af ampicillin, fordi de besidder ampicillinresistensgenet (AMPR) til stede i plasmidet. Her er sammenbruddet:

* PUC18: Dette er en kloningsvektor, et lille DNA -molekyle, der bruges til at transportere fremmed DNA ind i bakterier. Den indeholder en *replikationsoprindelse *, der giver den mulighed for at replikere inde i værtscellen, og et *multiple kloningssted *, hvor udenlandsk DNA kan indsættes.

* ampr -gen: Dette gen koder for et enzym kaldet beta-lactamase , som forringer ampicillin, et almindeligt antibiotikum.

* Transformation: Når bakterier transformeres med PUC18, erhverver de AMPR -genet sammen med plasmidet. Dette gen udtrykkes og producerer beta-lactamase.

* ampicillinresistens: Den producerede beta-lactamase inaktiverer ampicillinet i vækstmediet, hvilket gør det muligt for de transformerede bakterier at overleve og vokse i nærvær af antibiotikumet.

Kortfattet:

* PUC18 -plasmidet bærer AMPR -genet.

* Transformerede bakterier udtrykker AMPR-genet og producerer beta-lactamase.

* Beta-lactamase nedbryder ampicillin, hvilket gør bakterierne resistente over for antibiotikumet.

Derfor vil kun de transformerede celler, der bærer PUC18-plasmidet, overleve og vokse på et ampicillinholdigt medium. Dette selektive tryk bruges til at sikre, at kun cellerne, der har inkorporeret plasmidet, er valgt til yderligere undersøgelse eller manipulation.