Fosfatbindinger forbindes til 5'-hydroxylgruppen i et nukleotid til 3'-hydroxylgruppen i det næste nukleotid i en polynukleotidkæde. Gennem disse bindinger er nukleotiderne bundet sammen for at danne en rygrad, som giver nukleinsyren dens strukturelle integritet og giver mulighed for overførsel af genetisk information. Det specifikke mønster og sekvensen af fosfatbindinger er essentielle for den korrekte funktion af nukleinsyrer og spiller en afgørende rolle i forskellige cellulære processer, herunder DNA-replikation, transkription og proteinsyntese.