Hvad indeholder belastningsfarvestof?

1. Sporing af farvestof:

* Denne komponent giver dig mulighed for visuelt spore fremskridt med elektroforesen.

* Det er et farvet farvestof, der vandrer gennem gelen med en forudsigelig hastighed.

* Almindelige eksempler inkluderer:

* bromophenolblå: Migrerer med en lignende hastighed som et 300-400 bp fragment af DNA.

* xylen cyanol ff: Migrerer med en lignende hastighed som et 4-6 kb-fragment af DNA.

2. Glycerol/saccharose:

* Denne komponent gør prøven tættere end pufferopløsningen, så den synker ned i brønden og diffunderer ikke ud.

* Dette sikrer, at prøven indlæses korrekt og forbliver koncentreret i bunden af ​​brønden.

3. Buffere:

* Disse komponenter hjælper med at opretholde pH i prøven og pufferopløsningen under elektroforese.

* De sikrer den korrekte funktion af de enzymer, der er involveret i processen.

* Eksempler inkluderer Tris-Borate-EDTA (TBE) eller Tris-acetat-EDTA (TAE) -buffere.

4. Andre tilsætningsstoffer (valgfrit):

* SDS (natriumdodecylsulfat): Dette vaskemiddel tilsættes ofte til proteinprøver for at denaturere dem og belægge dem med en negativ ladning, hvilket giver dem mulighed for at migrere baseret på deres størrelse.

* Reduktion af agenter: Såsom dithiothreitol (DTT) eller ß-mercaptoethanol tilsættes undertiden for at bryde disulfidbindinger inden for proteiner, hvilket yderligere denaturerer dem.

nøglepunkter at huske:

* Den specifikke sammensætning af belastningsfarvestof kan variere afhængigt af den type elektroforese, der udføres (DNA, RNA eller protein).

* Valget af sporing af farvestof skal være passende til størrelsesområdet for de molekyler, der analyseres.

* Indlæsning af farvestof skal bruges sparsomt for at undgå at introducere for meget volumen til brøndene, hvilket kan påvirke båndopløsningen.

Fortæl mig, hvis du har andre spørgsmål!