* feltdybde: Dette henviser til rækkeafstandene inden for en scene, der ser acceptabelt skarpt i et billede. Når du fokuserer på et specifikt punkt, er kun genstande i den afstand perfekt skarpe. Objekter tættere eller længere væk bliver slørede.
* Høj forstørrelse: Dette øger størrelsen på billedet, men det reducerer også dybdeskarphedet. Jo mindre dybdeskarphed, desto mindre af objektet er i fokus på et givet tidspunkt.
Tænk på det sådan:
Forestil dig, at du har et forstørrelsesglas, og du ser på et stort insekt. Hvis du fokuserer på hovedet, vil benene være slørede. Hvis du fokuserer på benene, vil hovedet være sløret. Du kan kun se en del af insektet i fokus ad gangen.
Her er hvorfor dette sker:
* objektivfysik: Den måde, linser bøjer lys, bestemmer dybdeskarpen. Linser med højere forstørrelse bøjer lys mere, hvilket indsnævrer dybdeskarpen.
* Mikroskopi: Mikroskopmål har meget høj forstørrelse, hvilket fører til ekstremt lavt dybdeskarphed. Dette er grunden til, at du typisk har brug for at justere fokus for hvert plan i prøven for at se forskellige dele.
Hvad kan der gøres?
* Mikroskopteknikker: Mikroskopister bruger ofte teknikker som stabling af flere billeder, der er taget på forskellige fokusplaner for at skabe et sammensat billede med en større dybdeskarphed.
* Specialiseret udstyr: Mikroskoper med funktioner som udvidet dybde af feltlinser eller specialiseret software kan hjælpe med at overvinde denne begrænsning.
I det væsentlige gør høj forstørrelse det udfordrende at se alle dele af en stor organisme i fokus, fordi den drastisk reducerer feltdybden, hvilket betyder, at kun en meget lille række afstande vil være skarpe på et givet tidspunkt.