Hvad er fordelene ved HPLC over GC?

Kromatografiske teknikker udføres i videnskabelige laboratorier for at adskille kemiske forbindelser fra en ukendt prøve. Prøven opløses i et opløsningsmiddel og strømmer gennem en søjle, hvori den adskilles af tiltrækningen af ​​forbindelsen mod søjlens materiale. Denne polære og ikke-polære tiltrækning til søjlematerialet er den aktive kraft, der får forbindelserne til at adskille over tid. De to typer kromatografi, der anvendes i dag, er gaschromatografi (GC) og højtryksvæskekromatografi (HPLC).

Mobile Carrier Phase

Gaskromatografi fordamper prøven, og den bæres langs systemet ved en inert gas, såsom helium. Brug af hydrogen giver bedre adskillelse og effektivitet, men mange laboratorier forbyder brugen af ​​denne gas på grund af dets brændbare natur. Ved anvendelse af væskekromatografi forbliver prøven i flydende tilstand og skubbes gennem søjlen under højt tryk ved forskellige opløsningsmidler, såsom vand, methanol eller acetonitril. Forskellige koncentrationer af hvert opløsningsmiddel vil påvirke chromatografien af ​​hver forbindelse forskelligt. At have prøven forblev i dens flydende tilstand øger stabiliteten af ​​forbindelsen.

Kolonne Typer

Gaskromatografikolonner har en meget lille indre diameter og deres længde kan variere fra 10 til 45 meter. Disse silica-baserede søjler rulles sammen langs en cirkulær metalramme og opvarmes til en temperatur på 250 grader Fahrenheit. Væskekromatografikolonner er også silica-baserede, men har et tykt metalhus til at modstå høje mængder internt tryk. Disse kolonner arbejder under stuetemperatur og i intervallet fra 50 til 250 centimeter i længden.

Forbindelsestabilitet

Ved gaskromatografi fordampes prøven injiceret i systemet ved ca. 400 grader Fahrenheit, inden den er gennemført gennem søjlen. Forbindelsen skal således være i stand til at modstå varme ved høje temperaturer uden at nedbryde eller nedbryde til et andet molekyle. Væskekromatografiske systemer tillader forskeren at analysere større og mindre stabile forbindelser, fordi prøven ikke udsættes for varme.