Hvorfor bruger ammoniumsulfatsalt for det meste i proteinudfældning?

1. Høj opløselighed: Ammoniumsulfat er meget opløseligt i vand, hvilket muliggør oprettelse af koncentrerede opløsninger. Denne høje opløselighed muliggør tilsætning af store mængder salt til en proteinopløsning, hvilket øger den ioniske styrke og fremmer proteinudfældning.

2. Salting-out-effekt: Ammoniumsulfat udviser en stærk "saltning" -effekt. Dette betyder, at det forstyrrer hydratiseringsskallen omkring proteiner, reducerer deres opløselighed og tvinger dem til at udfælde ud af opløsningen. Princippet bag denne effekt er, at saltioner konkurrerer med proteinmolekylerne til vandmolekyler, hvilket fører til proteinaggregering og nedbør.

3. Selektiv nedbør: Ved omhyggeligt at kontrollere ammoniumsulfatkoncentrationen kan man selektivt udfælde forskellige proteiner baseret på deres individuelle opløselighedsegenskaber. Dette muliggør adskillelse af proteiner baseret på deres størrelse, ladning og hydrofobicitet.

4. Blid nedbør: Ammoniumsulfatudfældning betragtes generelt som en relativt blid metode sammenlignet med andre nedbørsteknikker, såsom anvendelse af organiske opløsningsmidler. Dette gør det velegnet til at bevare proteinernes integritet og aktivitet.

5. Brugervenlighed: Ammoniumsulfat er let tilgængeligt, billigt og let at bruge. Det fjernes også let fra det udfældede protein ved dialyse eller andre metoder, hvilket gør det til et praktisk valg til proteinoprensning.

6. Proteinstabilisering: Interessant nok ved lave koncentrationer kan ammoniumsulfat faktisk øge proteinstabiliteten ved at fremme proteinfoldning og reducere aggregering.

7. Bred anvendelighed: Ammoniumsulfatudfældning er en alsidig teknik, der anvendes til en lang række proteiner, fra små enzymer til store antistoffer.

Imidlertid findes der nogle begrænsninger:

* høje saltkoncentrationer kan være skadelige for nogle proteiner.

* Metoden er muligvis ikke egnet til alle proteiner, især dem med meget lav opløselighed eller høj følsomhed over for salt.

Generelt gør ammoniumsulfats høje opløselighed, saltningseffekt, selektivitet, mildhed, brugervenlighed og bred anvendelighed det til en meget effektiv og almindeligt anvendt reagens til proteinudfældning og oprensning.