1. Prøveforberedelse:
- Få den hydrolyserede stivelsesprøve.
- Forbered to sæt prøver:
- Prøve A:Hydrolyseret stivelsesopløsning
- Prøve B:En kendt standardopløsning, der indeholder en blanding af forskellige sukkerarter (såsom glucose, fructose, saccharose osv.)
2. Vælg en passende kromatografiteknik:
- Vælg en passende kromatografiteknik, såsom Thin-Layer Chromatography (TLC) eller Paper Chromatography.
3. Forberedelse af den kromatografiske plade eller papir:
- Til TLC forberedes en TLC-plade med en passende stationær fase (f.eks. silicagel).
- Til papirkromatografi skal du bruge kromatografisk papir.
4. Anvendelse af prøver:
- Plet en lille mængde prøve A (hydrolyseret stivelse) og prøve B (standard sukkerblanding) på den kromatografiske plade eller papir.
5. Udvikling af kromatogram:
- Anbring den kromatografiske plade eller papiret i kromatografikammeret, der indeholder en passende mobil fase (f.eks. en opløsningsmiddelblanding).
- Tillad den mobile fase at migrere gennem den stationære fase med prøvekomponenterne.
6. Visualisering:
- Når den mobile fase har nået det ønskede niveau, fjernes kromatografipladen eller papiret fra kammeret.
- Brug passende detektionsmetoder for at visualisere de adskilte komponenter. For eksempel ved sukkerkromatografi kan sprøjtning af pladen med et visualiseringsmiddel (f.eks. aniliner, orcinol osv.) efterfulgt af opvarmning afsløre tilstedeværelsen og placeringen af sukkerarter som farvede pletter.
7. Sammenligning og analyse:
- Sammenlign positionerne og farverne på pletterne dannet af den hydrolyserede stivelsesprøve (prøve A) med dem, der dannes af de kendte sukkerstandarder (prøve B).
8. Fortolkning:
- Hvis den hydrolyserede stivelsesprøve (prøve A) kun producerer én plet, og dens position og farve stemmer overens med en af pletterne i standardsukkerblandingen, tyder det på, at hydrolysen af stivelse har givet et enkelt sukker.
- Hvis der observeres flere pletter i prøve A, som hver svarer til en forskellig sukkerstandard, indikerer det, at hydrolysen af stivelse har produceret flere sukkerarter.
Ved at udføre kromatografi og analysere de opnåede pletter er det muligt at bestemme, om hydrolysen af stivelse har resulteret i dannelsen af et enkelt sukker eller flere sukkerarter.